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簡述牛雌二醇ELISA 試劑盒內容及配制

點擊次數(shù):919 更新時間:2012-08-09
 

簡述牛雌二醇ELISA 試劑盒內容及配制

試驗原理:

Estradiol試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA.已知Estradiol濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內進行檢測。先將Estradiol和生物素標記的抗體同時溫育。洗滌后,加入親和素標記過的HRP。再經過溫育和洗滌,去除未結合的酶結合物,然后加入底物A、B,和酶結合物同時作用。產生顏色。Estradiol的濃度呈比例關系。

牛雌二醇ELISA 試劑盒

顏色的深淺和樣品中

 

 

試劑盒內容及其配制:

 

試劑盒成份

96孔配置

48孔配置

96/48人份酶標板

1塊板(96T

半塊(48T

塑料膜板蓋

1

半塊

標準品:400pmol/L

1瓶(1.0ml

1瓶(0.5ml

空白對照

1瓶(1.0ml

1瓶(0.5ml

標準品稀釋緩沖液

1瓶(8.0ml

1瓶(4.0ml

生物素標記的抗Estradiol抗體

1瓶(8.0ml

1瓶(4.0ml

親和鏈酶素-HRP

1瓶(12ml

1瓶(6.0ml

洗滌緩沖液

1瓶(20ml

1瓶(10ml

底物A

1瓶(6.0ml

1瓶(3.0ml

底物B

1瓶(6.0ml

1瓶(3.0ml

終止液

1瓶(6.0ml

1瓶(3.0ml

 

 

自備材料:

 

 

 

1. 蒸餾水。

 

 

2. 加樣器:5ul10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul

3. 振蕩器及磁力攪拌器等。

 

4. 

安全性:

 

 

 

1. 避免直接接觸終止液和底物AB。一旦接觸到這些液體,請盡快用水沖洗。牛雌二醇ELISA 試劑盒

 

2. 實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。

3. 不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。

 

 

試劑的準備:

 

 

 

1. 標準品:標準品的系列稀釋應在實驗時準備,不能儲存。稀釋前將標準品振蕩混勻。稀釋比例按下表中進行:

 

 

400

 pmol/L

6號標準品)

原倍濃度不用稀釋直接加入50ul。

200 

pmol/L

5號標準品)

100ul的原倍標準品加入100ul的標準品稀釋液

100 

pmol/L

4號標準品)

100ul5號標準品加入100ul的標準品稀釋液

50 

pmol/L

3號標準品)

100ul4號標準品加入100ul的標準品稀釋液

25

pmol/L

2號標準品)

100ul3號標準品加入100ul的標準品稀釋液

12.5 pmol/L

1號標準品)

100ul2號標準品加入100ul的標準品稀釋液

0 pmol/L

(空白對照)

原始濃度不用稀釋直接加入50ul。

 

 

2. 洗滌緩沖液(50×)的稀釋:蒸餾水50倍稀釋。

 

 

 

試劑盒性能:

 

 

 

 

1. 靈敏度:zui小的檢測濃度小于1號標準品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預期濃度相關系數(shù)R值為0.990。

 

 

2. 特異性:不與其它細胞因子反應。牛雌二醇ELISA 試劑盒

3. 重復性:板內、板間變異系數(shù)均小于10%。

 
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