簡述牛雌二醇ELISA 試劑盒內容及配制 試驗原理: Estradiol試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA).已知Estradiol濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內進行檢測。先將Estradiol和生物素標記的抗體同時溫育。洗滌后,加入親和素標記過的HRP。再經過溫育和洗滌,去除未結合的酶結合物,然后加入底物A、B,和酶結合物同時作用。產生顏色。Estradiol的濃度呈比例關系。 顏色的深淺和樣品中
試劑盒內容及其配制:
| 96孔配置 | 48孔配置 | 96/48人份酶標板 | 1塊板(96T) | 半塊(48T) | 塑料膜板蓋 | 1塊 | 半塊 | 標準品:400pmol/L | 1瓶(1.0ml) | 1瓶(0.5ml) | 空白對照 | 1瓶(1.0ml) | 1瓶(0.5ml) | 標準品稀釋緩沖液 | 1瓶(8.0ml) | 1瓶(4.0ml) | 生物素標記的抗Estradiol抗體 | 1瓶(8.0ml) | 1瓶(4.0ml) | 親和鏈酶素-HRP | 1瓶(12ml) | 1瓶(6.0ml) | 洗滌緩沖液 | 1瓶(20ml) | 1瓶(10ml) | 底物A | 1瓶(6.0ml) | 1瓶(3.0ml) | 底物B | 1瓶(6.0ml) | 1瓶(3.0ml) | 終止液 | 1瓶(6.0ml) | 1瓶(3.0ml) |
自備材料:
1. 蒸餾水。
2. 加樣器:5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。
3. 振蕩器及磁力攪拌器等。 4. 安全性:
1. 避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體,請盡快用水沖洗。牛雌二醇ELISA 試劑盒
2. 實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。
3. 不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。
試劑的準備:
1. 標準品:標準品的系列稀釋應在實驗時準備,不能儲存。稀釋前將標準品振蕩混勻。稀釋比例按下表中進行:
pmol/L | (6號標準品) | 原倍濃度不用稀釋直接加入50ul。 | 200 pmol/L | (5號標準品) | 100ul的原倍標準品加入100ul的標準品稀釋液 | 100 pmol/L | (4號標準品) | 100ul的5號標準品加入100ul的標準品稀釋液 | 50 pmol/L | (3號標準品) | 100ul的4號標準品加入100ul的標準品稀釋液 | 25 pmol/L | (2號標準品) | 100ul的3號標準品加入100ul的標準品稀釋液 | 12.5 pmol/L | (1號標準品) | 100ul的2號標準品加入100ul的標準品稀釋液 | 0 pmol/L | (空白對照) | 原始濃度不用稀釋直接加入50ul。 |
2. 洗滌緩沖液(50×)的稀釋:蒸餾水50倍稀釋。
試劑盒性能:
1. 靈敏度:zui小的檢測濃度小于1號標準品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預期濃度相關系數(shù)R值為0.990。
2. 特異性:不與其它細胞因子反應。牛雌二醇ELISA 試劑盒
3. 重復性:板內、板間變異系數(shù)均小于10%。 |