實(shí)驗(yàn)外包: 1.基因組學(xué):基因芯片、SNP檢測(cè)、DNA甲基化檢測(cè)、生物信息學(xué)分析 2.轉(zhuǎn)錄組學(xué):microRNA芯片、LncRNA芯片、表達(dá)譜芯片、RNA-seq 3.蛋白質(zhì)組學(xué):2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM 4.基因檢測(cè):DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR 5.蛋白質(zhì)檢測(cè):Western blot、Co-ip EMSA、CHIP、免疫熒光、ELISA 6.病理檢測(cè):HE染色、特殊染色、組織切片、免疫組化、流式細(xì)胞分選 7.代謝組學(xué):GC-MS、LC-MS、NMR 8.細(xì)胞及動(dòng)物模型:原代細(xì)胞、細(xì)胞模型、動(dòng)物模型構(gòu)建 服務(wù)流程: 接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質(zhì)量檢測(cè)——樣品cDNA合成——定量試驗(yàn)——數(shù)據(jù)分析——結(jié)果交付——售后服務(wù)。 ? 產(chǎn)品名稱 | 佩氏著色霉PCR檢測(cè)試劑盒 | 英文名稱 | Fonsecaea pedrosoiPCR | 貨號(hào) | HE30995-R |
使用方法: 一、樣品 DNA 的制備 用自選方法提取 Cps DNA。注意:DNA 純化方法是決定檢測(cè)靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA,后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測(cè)靈敏度。 二、制備 Cps 標(biāo)準(zhǔn)曲線(以 10-10E6 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染原,本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽性對(duì)照,只提供沒有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽性對(duì)照。 1. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管,分別為 6,5,4,3,2 和 1 號(hào)。 2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水(用帶芯槍頭,下同)。 3. 產(chǎn)品僅用于科研先將本試劑盒提供的陽性對(duì)照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL(注:請(qǐng)不要將本試劑盒提供的標(biāo)準(zhǔn)品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL,建議每次稀釋 10 倍,梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL)。 4. 在 6 號(hào)管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽性對(duì)照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 10E6 拷貝/μL 的陽性對(duì)照。 5. 換槍頭,從 6 號(hào)管中取 5 μL 溶液到 5 號(hào)管中,充分震蕩 1 分鐘,得 10E5拷貝/μL 的陽性對(duì)照。 6. 換槍頭,從 5 號(hào)管中取 5 μL 溶液到 4 號(hào)管中,重復(fù)上面的操作直到得到 6個(gè)稀釋度的陽性對(duì)照。7. NC 管中不加任何陽性對(duì)照。 8. 從 1-6 號(hào)管中分別取 5 μL 和待測(cè)樣品一起進(jìn)行定量 PCR(見下步),每個(gè)樣品做 3 次重復(fù)。PCR 后得到每個(gè)陽性對(duì)照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值,并以之為縱軸,以濃度的對(duì)數(shù)值為橫軸,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。 PCR實(shí)驗(yàn)方法步驟: 方法 1:在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。 10×PCR buffer 5 μl dNTP mix (2mM) 4 μl 引物1(10pM) 2 μl 引物2(10pM) 2 μl Taq酶 (2U/μl) 1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl 加ddH2O至 50 μl 視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。 2:調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,在72℃ 保7min。 3:伴放線放線桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。 4:PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μl進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。 特點(diǎn)優(yōu)勢(shì): 1. 特異性:所有產(chǎn)品使用的引物均經(jīng)過詳盡的生物信息學(xué)分析,經(jīng)過TIANDZ及自建龐大數(shù)據(jù)庫(kù)的比對(duì),確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區(qū)段,可實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)菌種屬及血清型的特異檢測(cè),特異性均達(dá)到100%。 2. 重現(xiàn)性:該系列所有產(chǎn)品均經(jīng)過大量實(shí)驗(yàn)菌株的驗(yàn)證,重現(xiàn)性為100%。 3. 靈敏性:該系列產(chǎn)品可實(shí)現(xiàn)對(duì)檢測(cè)菌的高靈敏檢測(cè),當(dāng)樣品中細(xì)菌的濃度達(dá)到103cfu/ml時(shí),可實(shí)現(xiàn)對(duì)其的直接檢測(cè),無需繁瑣的增菌過程。 4. 實(shí)用性:產(chǎn)品僅用于科研檢測(cè)范圍廣,涵蓋了對(duì)人體危害較為嚴(yán)重的17種呼吸道及腸道致病菌,可實(shí)現(xiàn)對(duì)臨床樣品及其他環(huán)境取樣的快速檢測(cè),整個(gè)檢測(cè)過程為3-4個(gè)小時(shí)。 5. 優(yōu)勢(shì)1:序列資源豐富,除TIANDZ公布的序列外,公司還進(jìn)行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。 6. 優(yōu)勢(shì)2:該系列試劑盒均經(jīng)過大量的保守性及特異性實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測(cè)試劑盒均經(jīng)過了20余種標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的保守性驗(yàn)證及40余種近緣標(biāo)準(zhǔn)菌株和臨床菌株的特異性驗(yàn)證,確保在使用過程中不會(huì)出現(xiàn)任何的假陽性及假陰性報(bào)告結(jié)果。 聚乙烯吡咯烷酮/聚N-乙烯基丁基內(nèi)酰胺/聚維酮/l-乙烯基2-吡咯烷酮均聚物/皮維/PVP 質(zhì)量規(guī)格:用于液相色譜-質(zhì)譜的離子對(duì)試劑 包裝;1g 1,3-二羥基/二羥基/1,3-二羥基二甲基酮/1,3-二羥基二聚體/1,3-二羥基二醚/1,3-Dihydroxyacetone dimmer 質(zhì)量規(guī)格:用于液相色譜-質(zhì)譜的離子對(duì)試劑 包裝;5g 4-氨基安替比林/1,5-二甲基-2-苯基-4-氨基-3-吡唑啉酮/4-氨基非那宗/4-氨基-2,3-二甲基-1-苯基-5-吡唑啉酮/4-氨基-1,2-二氫-1,5-二甲基-2-苯基-3H-吡唑-3-酮/4-氨基-2,3-二甲基-1-苯基代吡唑啉酮-[5] /4-氨基安替吡啉/4-Aminoantipyrine 質(zhì)量規(guī)格:用于液相色譜-質(zhì)譜的離子對(duì)試劑 包裝;25g 環(huán)己酮/環(huán)已酮/安酮/Cyclohexanone 質(zhì)量規(guī)格:用于液相色譜-質(zhì)譜的離子對(duì)試劑 包裝;5g 苯乙酮/甲基苯基酮/乙酰苯/1-苯乙酮/蚊蠅凈煙棒/甲基苯/苯基甲/苯基?;淄?Acetophenone 質(zhì)量規(guī)格:離子對(duì)色譜用試劑 包裝;5g 3-氨基苯乙酮/間氨基苯乙酮/間乙酰/間氨基乙酰苯/3-乙酰基/間氨基苯基甲基酮/3'-Aminoacetophenone 質(zhì)量規(guī)格:離子對(duì)色譜用試劑 包裝;5MG 4-氨基苯乙酮/對(duì)氨基苯乙酮/對(duì)乙酰/對(duì)氨基乙酰苯/對(duì)氨基苯基甲基酮/對(duì)氨基苯甲基酮/4-乙?;?4-Aminoacetophenone 質(zhì)量規(guī)格:離子對(duì)色譜用試劑 包裝;100g 亞芐基/芐叉/苯酮/苯亞甲基/4-苯基-3--2-酮/α-苯-γ-酮/苯-[1]-酮-[3]/芐亞/甲基苯乙烯/甲基苯乙烯基酮/甲基肉桂/Benzylideneacetone 質(zhì)量規(guī)格:離子對(duì)色譜用試劑 包裝;25g 苯并蒽酮/苯嵌蒽酮/7H-苯并[DE]蒽-7-酮/苯繞蒽酮/7H-苯[脫]蒽-7-酮/Benzanthrone 質(zhì)量規(guī)格:離子對(duì)色譜用試劑 包裝;1g 苯甲酰三氟/1-苯基-4,4,4-三氟-1,3-丁二酮/苯酰三氟/3-苯甲酰-1,1,1-三氟/4,4,4-三氟-1-苯基-1,3-丁二酮/BFA/BTA 質(zhì)量規(guī)格:離子對(duì)色譜用試劑 包裝;250mg 芐/芐基/4-苯基-2-丁酮/4-苯基丁酮/Benzylacetone 質(zhì)量規(guī)格:離子對(duì)色譜用試劑 包裝;5g 雙吡唑酮/雙吡唑啉酮/雙(1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮)/4,4′-雙(3-甲基-1-苯基吡唑啉-5-酮)/4,4′-雙(1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮)/3,3′-二甲基-1,1′-二苯基[4,4′-雙(2-吡唑啉)-5,5′-二酮]/2,2'4,4'-四氫-5,5'-二甲基-2,2'-二苯基-[4,4'-雙-3H-吡唑]-3,3'-二酮/雙(3-甲基-1-苯基-5-吡唑啉酮)/4,4-雙(3-甲基-1-苯基-5-吡唑啉酮)/Bis-pyrazolone 質(zhì)量規(guī)格:用于液相色譜-質(zhì)譜的離子對(duì)試劑 包裝;1g 環(huán)辛酮/Cyclooctanone 質(zhì)量規(guī)格:用于液相色譜-質(zhì)譜的離子對(duì)試劑 包裝;5g 2-癸酮/甲基辛基酮/甲基辛/甲基正辛/2-癸烷/甲基正辛基酮/2-Decanone 質(zhì)量規(guī)格:用于氨類的熒光離子對(duì)試劑 包裝;1g 二苯甲酮/苯酮/二苯酮/苯酰苯/苯甲酰苯/Benzophenone 質(zhì)量規(guī)格:分析標(biāo)準(zhǔn)品,99.5% 包裝;250mg 9-芴酮/芴酮,亞聯(lián)苯/9H-芴-9-酮/芴氧/二苯并五環(huán)酮/9-側(cè)氧茀/9-Fluorenone 質(zhì)量規(guī)格:AR 包裝;5g 2-氟苯乙酮/鄰氟苯乙酮/2'-Fluoroacetophenone 質(zhì)量規(guī)格:IND 包裝;1g 佩氏著色霉PCR檢測(cè)試劑盒Pelagibacterium│nitratireducens 中文名稱:硝酸鹽還原遠(yuǎn)洋桿菌種屬:Pelagibacterium│nitratireducens分離基物:樣/表層海提供形式:凍干物安全等級(jí):1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:大洋細(xì)菌培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:471生長(zhǎng)條件:28℃存儲(chǔ)條件:液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:98% Thermococcus│sp. 中文名稱:熱球菌種屬:Thermococcus│sp.分離基物:深海熱液口沉積物提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:微生物/嗜熱古菌;生物轉(zhuǎn)化微生物/能利用單質(zhì)硫培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:823生長(zhǎng)條件:75℃存儲(chǔ)條件:液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:98% Dothiorella│aegiceri 中文名稱:殼菌(加詞待譯)種屬:Dothiorella│aegiceri分離基物:生物樣/桐花樹-枝提供形式:斜面培養(yǎng)物模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:近海絲狀真菌培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:14生長(zhǎng)條件:25℃存儲(chǔ)條件:液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法 純度:98% Candida│humilis 中文名稱:小假絲酵母種屬:Candida│humilis分離基物:生物樣/未知魚//魚皮提供形式:斜面培養(yǎng)物安全等級(jí):1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:共生微生物/魚類共生菌培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:513生長(zhǎng)條件:28℃存儲(chǔ)條件:液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法 純度:98% Shimia│marina 中文名稱:海沈氏菌種屬:Shimia│marina分離基物:樣/CTD表層樣提供形式:凍干物安全等級(jí):1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:產(chǎn)酶微生物/產(chǎn)酪蛋白酶、過氧化氫酶;未檢測(cè)到果膠酶、纖維素酶、淀粉酶、瓊脂酶培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:471生長(zhǎng)條件:30℃存儲(chǔ)條件:液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:98% Pseudoclavibacter│faecalis 中文名稱:糞便假棍狀桿菌種屬:Pseudoclavibacter│faecalis分離基物:沉積物/箱式沉積物提供形式:凍干物安全等級(jí):1模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:未檢測(cè)到果膠酶、酪蛋白酶、纖維素酶、淀粉酶、瓊脂酶,檢測(cè)到過氧化氫酶培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:471生長(zhǎng)條件:30℃存儲(chǔ)條件:液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:97% Paracoccus│denitrificans 中文名稱:脫氮副球菌種屬:Paracoccus│denitrificans分離基物:沉積物/多管沉積物(10-20)提供形式:凍干物模式菌株:no應(yīng)用領(lǐng)域:大洋細(xì)菌培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:471生長(zhǎng)條件:28℃存儲(chǔ)條件:液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:97% Vibrio│natriegens 中文名稱:需鈉弧菌(漂浮弧菌)種屬:Vibrio│natriegens分離基物:沉積物/鹽沼澤地的泥提供形式:凍干物安全等級(jí):1模式菌株:yes應(yīng)用領(lǐng)域:模式菌株:;培養(yǎng)方法培養(yǎng)基:471生長(zhǎng)條件:26℃存儲(chǔ)條件:液氮超低溫凍結(jié)法;-80℃冰箱凍結(jié)法;真空冷凍干燥法 純度:98% ? |